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Fluo-8, AM 钙荧光探针Fluo-8, AM

更新时间:2019-04-26

简要描述:

Fluo-8, AM是较常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。[ Fluo-8, AM ] 钙荧光探针Fluo-8, AM

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[ Fluo-8, AM ] 钙荧光探针Fluo-8, AM

中文名:钙荧光探针Fluo-8, AM

英文名:1-[2-Amino-5-(6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester

分子式:C51H52N2O23

分子量:1060.30

性质:

1. 外观:橙红色粉末

2. 纯度:≥90%HPLC

3. 产品描述:

Fluo-8, AM是常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。它穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-8,从而被滞留在细胞内,Fluo-8若以游离配体形式存在时几乎是非荧光性的,但是当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,大激发波长为490nm,大发射波长为514nm。可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。

4. 操作说明(for Human T cells*
1 试剂
2 mMFluo-8, AM/DMSO(将1mg Fluo-8, AM溶于442µL DMSO 
Pluronic F127
Hanks•balanced salt solution
HBSS 
HEPES buffer saline10mM HEPES1mM Na2HPO4137mM NaCl5mM KCl1mM CaCl20.5mM MgCl25mM glucose0.1% BSApH 7.4
2 操作
. Fluo-8, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127Pluronic F127可以    防止Fluo-8, AMHBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
. HBSS稀释Fluo-8, AM溶液,制备4µMFluo-8, AM工作液。
. Fluo-8, AM工作液加入细胞,在37培养20分钟。
. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS,再继续培养40分钟。
. HEPES buffer saline洗涤细胞3次,然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮,制成1×105 cells/mL的溶液。
. 37下培养10分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。激发波长490nm,发射波长514nm  
*
标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定条件。以上方法仅供参考。

储存条件:-20干燥避光保存,有效期一年。

供应商:杭州新乔生物科技有限公司

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