新乔生物：水溶Sulfo-Cy5-NHS磺化 Cy5 活性酯CAS146368-14-1详情

Sulfo-Cy5-NHS（Sulfo-Cyanine5 NHS ester，磺化 Cy5 琥珀酰亚胺活性酯）CAS：146368-14-1

 别名：Sulfo-Cy5 SE、磺化 Cy5 活性酯；双磺酸根水溶性远红光花菁染料，胺反应型，仅科研使用

 一、基础理化 & 光谱参数

- 分子式：C37H43N3O10S2

- 分子量：753.88

- 外观：深蓝色至紫黑色固体粉末

- 光谱（PBS）：ex=646 nm，em=662-670 nm；摩尔消光系数 271000 M-1cm-1；荧光量子产率≈0.28；pH 4–10 荧光稳定，适配 633 / 647 nm 激光器，光谱对标 Alexa Fluor 647、DyLight649

- 溶解性：极易溶于水，也溶于 DMSO/DMF/ 甲醇；纯缓冲液即可标记，不需要有机共溶剂，这是核心优势

- 反应基团：NHS 琥珀酰亚胺活性酯，选择性和伯氨基（-NH₂）反应生成稳定酰胺键；反应缓冲液推荐 pH 8.0–8.5；NHS 在水中仍会缓慢水解，需要控制反应时间，缓冲液不能含 Tris、甘氨酸等游离伯胺（会竞争消耗染料）

- 电荷特性：带两个负电磺酸基团；细胞膜不透，适合标记胞外 / 膜表面生物分子

- 储存：-20 ℃，干燥避光密封防潮；固体长期保存；水溶液母液不稳定，建议现配现用

 二、标记原理

NHS 活性酯在弱碱性水相条件下，与蛋白赖氨酸侧链氨基、氨基修饰多肽 / 氨基修饰寡核苷酸共价偶联；磺酸基团增加染料亲水性，降低染料 - 染料聚集淬灭，相比脂溶性 Cy5-NHS，高标记度下荧光保留更好，非特异性吸附更低。

 天然核酸无游离伯胺，必须氨基修饰后才能标记。

 三、主要应用（和脂溶性 Cy5-NHS 对比，更适合敏感生物样品）

1. 抗体 / 敏感蛋白标记（主流）

无需 DMSO/DMF，不会造成抗体、脆弱重组蛋白变性。标记一抗二抗，用于免疫荧光 IF、WB、IHC。远红光波段细胞自发荧光极低，信噪比高。

2.多肽、氨基修饰寡核苷酸标记

制备荧光探针，用于 FISH、TaqMan qPCR 探针、分子信标、多肽体外示踪。水溶性好，标记产物在缓冲液中不易沉淀。

3. 流式细胞术、多色流式分选 FACS

640 nm 通道，搭配 FITC/Cy3 做多色免疫分型；染料带负电，对细胞膜非特异吸附更小，背景更低。

4. 纳米生物载体标记

标记氨基修饰二氧化硅纳米粒、脂质体、聚合物纳米颗粒、纳米药物载体；水相直接标记，染料不易疏水团聚；适合体外细胞示踪、小动物活体荧光成像 IVIS，评估纳米颗粒体内分布、富集、代谢。

5. 生物芯片、液相生物分析

蛋白微阵列、核酸芯片荧光标记；免疫荧光微球、均相荧光免疫检测。

6. 组织切片成像

厚组织成像，远红光穿透强；磺酸基团降低染料在组织中非特异性疏水吸附，背景优于脂溶性 Cy5 标记产物。