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没想到吧!蛋白交联剂的使用原来是这样的!
发布时间:2021-06-21   点击次数:40次
     蛋白交联剂是一类小分子化合物,具有2个或者更多的针对特殊基团(-NH2、-COOH、-HS等)的反应性末端,可以和2个或者更多的分子分别偶联,从而使这些分子结合在一起。70年代时人们普遍使用戊二醛作为蛋白质交联剂连接抗体和指示剂(如酶类),但其缺点是由于交联基团是随机的,容易形成杂乱的多聚体。80年代,更具选择特异性的交联剂,例如NHS(针对-COOH)和马来酰亚胺(针对-HS)在生命科学研究中得到了更为广泛的应用。巧妙地运用交联剂可以在蛋白质相互作用研究,免疫学,癌症治疗等领域取得意想之外的收获。截至2010年,市面常用的蛋白质交联剂大约有一百多种。
    交联剂是指一类分子两端各有一个相同或者不同的活性基团,它们可与其他分子上的胺基、巯基、羟基等发生共价结合而产生交联作用的试剂,交联剂可分为三种类型:同型双功能试剂、异型双功能试剂和可被光活化试剂。交联反应已成为研究蛋白质亚基结构功能及相互作用的一种重要手段,可提供许多关于蛋白质构像、亚基组成、结构功能及其相互作用方面的重要信息,也是合成功能高分子材料的一种重要原料。
    蛋白交联剂的操作流程:首先将待交联的蛋白质A与交联剂在一定条件下反应,得到的蛋白质A-交联剂中间体,然后移除多余的交联剂,再加入欲交联的蛋白质B。产物中可能会形成多聚体,这一副产物通过调节反应条件来控制。分成两部反应的目的在于减少分子内交联以及形成蛋白质多聚物。另外,选择异源交联剂也可以减少多聚物的产生。
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