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蛋白交联剂可分为三大类你知道吗?
发布时间:2021-05-27   点击次数:36次
   蛋白交联剂是一类小分子化合物,具有2个或者更多的针对特殊基团(-NH2、-COOH、-HS等)的反应性末端,可以和2个或者更多的分子分别偶联,从而使这些分子结合在一起。70年代时人们普遍使用戊二醛作为蛋白质交联剂连接抗体和指示剂(如酶类),但其缺点是由于交联基团是随机的,容易形成杂乱的多聚体。80年代,更具选择特异性的交联剂,例如NHS(针对-COOH)和马来酰亚胺(针对-HS)在生命科学研究中得到了更为广泛的应用。巧妙地运用交联剂可以在蛋白质相互作用研究,免疫学,癌症治疗等领域取得意想之外的收获。截至2010年,市面常用的蛋白质交联剂大约有一百多种。
  蛋白交联剂分为三大类:同源交联剂,异源交联剂,光反应交联剂。
  同源交联剂:具有两个相同活化反应基团。应用:一步反应,分子内交联,多聚反应,稳定四级结构
  异源交联剂:具有两个不同活化反应基团。应用:两步反应交联,可减少聚集和自身交联。
  光反应交联剂:反应原则:首先交联不稳定的热反应活性基团(与第—种蛋白质),然后UV交联,将第—种蛋白质交联到第二种蛋白质的N-H,C-H上。特点:交联非特异性,产率低。
  大多数蛋白质-蛋白质结合相互作用是瞬时的,通过交联方法可以稳定或连接相互作用复合物中的成分,从而有助于鉴别这些瞬时接触。一旦相互作用的成分被共价偶联,可以使用其他步骤(例如细胞裂解,亲和纯化和电泳)来制备分析样品,同时可维持初的相互作用复合物。
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